微生物限度檢測儀 內(nèi)置隔膜泵 CYW-300B 薄膜過濾器 不銹鋼6聯(lián) ??

微生物限度檢測儀 內(nèi)置隔膜泵  CYW-300B 薄膜過濾器 不銹鋼6聯(lián)

5.試驗(yàn)結(jié)果
5.1產(chǎn)品試驗(yàn)組微生物生長檢查情況： 批號：
5.2供試品對照組微生物生長檢查情況： 批號：
5.3稀釋劑對照組微生物生長檢查情況： 批號：
5.4菌液組微生物生長檢查情況： 批號：
6.回收率計(jì)算
6.1稀釋劑對照組菌回收率
表中：回收率=稀釋劑對照組的平均菌落數(shù)÷菌液組的平均菌落數(shù)。
6.2試驗(yàn)組菌回收率
表中：回收率=（試驗(yàn)組的平均菌落數(shù)－供試品對照組的平均菌落數(shù)）÷菌液組的平均菌落數(shù)。
7.結(jié)論：
7.1經(jīng)過驗(yàn)證，大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、黑曲霉的回收率分別為 %、 %、 %、 %、 %。
7.2稀釋劑回收率為 %、 %、 %、 %、 %。
以上驗(yàn)證結(jié)果證明，本品 采用上述方法進(jìn)行微生物限度檢查。
檢驗(yàn)人： 復(fù)核人：
8.驗(yàn)證結(jié)果評價(jià)分析
質(zhì)控部負(fù)責(zé)各項(xiàng)驗(yàn)證、試驗(yàn)結(jié)果記錄，驗(yàn)證小組根據(jù)驗(yàn)證、試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行評價(jià)，起草驗(yàn)證報(bào)告，報(bào)驗(yàn)證委員會。
驗(yàn)證委員會負(fù)責(zé)對驗(yàn)證結(jié)果進(jìn)行綜合評審，做出驗(yàn)證結(jié)論，發(fā)放驗(yàn)證證書。對驗(yàn)證結(jié)果的評審應(yīng)包括：
（1） 驗(yàn)證試驗(yàn)是否有遺漏；
（2） 驗(yàn)證實(shí)施過程中對驗(yàn)證方案有改，修改原因、依據(jù)以及是否經(jīng)過批準(zhǔn)；
（3） 驗(yàn)證記錄是否完整；
（4） 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求，偏差及對偏差的說明是否合理，是否需進(jìn)一步補(bǔ)充試驗(yàn)。
9.*終審批
驗(yàn)證報(bào)告由驗(yàn)證組長審核后，報(bào)驗(yàn)證總負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)，并簽發(fā)驗(yàn)證證書。
驗(yàn)證報(bào)告
年 月 日至 年 月 日，驗(yàn)證小組根據(jù)批準(zhǔn)的微生物限度檢查方法（薄膜過濾法）驗(yàn)證文件對微生物限度檢查法進(jìn)行了相關(guān)的一系列驗(yàn)證工作，達(dá)到了預(yù)期效果，滋將有關(guān)事項(xiàng)說明如下：
1、 驗(yàn)證方案在實(shí)施過程中未做修改。
2、 驗(yàn)證方案各項(xiàng)性能指標(biāo)在驗(yàn)證中未作變動(dòng)，誤差在允許范圍內(nèi)。
3、 驗(yàn)證過程中結(jié)果符合規(guī)定要求，記錄完整屬實(shí)。
4、 驗(yàn)證結(jié)果符合設(shè)計(jì)要求和GMP原則要求，可以投入使用。
5、 組分或檢驗(yàn)條件改變時(shí)須重新驗(yàn)證。
以上情況，請驗(yàn)證委員會審批！

2.5 平板菌落計(jì)數(shù)法
　　這是一種常用的活菌計(jì)數(shù)法。將待測菌液進(jìn)行梯度稀釋，取體積的稀釋菌液與合適的固體培養(yǎng)基在凝固前均勻混合，或?qū)⒕和坎加谝涯痰墓腆w培養(yǎng)基平板上。保溫培養(yǎng)后，用平板上出現(xiàn)的菌落數(shù)乘以菌液稀釋度，即可算出原菌液的含菌數(shù)。一般以直徑9 cm的平板上出現(xiàn)50~500個(gè)菌落為宜。但方法比較麻煩，操作者需有熟練的技術(shù)。平板菌落計(jì)數(shù)法不僅可以得出菌液中活菌的含菌數(shù)，而且同時(shí)將菌液中的細(xì)菌進(jìn)行了一次分離培養(yǎng)，獲得了。
　　2.6 試劑紙
　　在平板計(jì)數(shù)法的基礎(chǔ)上，發(fā)展了小型商品化產(chǎn)品以供快速計(jì)數(shù)用。形式有小型厚濾紙片，瓊脂片等。在濾紙和瓊脂片中吸有合適的培養(yǎng)基，其中加入活性指示劑2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑（TTC，無色）待蘸取測試菌液后置密封包裝袋中培養(yǎng)。短期培養(yǎng)后在濾紙上出現(xiàn)密度的玫瑰色微小菌落與標(biāo)準(zhǔn)紙色板上圖譜比較即可估算出樣品的含菌量。試劑紙法計(jì)數(shù)快捷準(zhǔn)確，相比而言避免了平板計(jì)數(shù)法的人為操作誤差。
　　2.7 膜過濾法
　　用特殊的濾膜過濾體積的含菌樣品，經(jīng)丫叮橙染色，在紫外顯微鏡下觀察細(xì)胞的熒光，活細(xì)胞會發(fā)橙色熒光，而死細(xì)胞則發(fā)綠色熒光。
　　3. 間接測定法
　　微生物的生長伴隨著一系列生理指標(biāo)發(fā)生變化，例如酸堿度，發(fā)酵液中的含氮量，含糖量，產(chǎn)氣量等，與生長量相平行的生理指標(biāo)很多，它們可作為生長測定的相對值。因此可利用生理指標(biāo)等間接參數(shù)來測定生物量。
　　3.1 測定含氮量
　　大多數(shù)細(xì)菌的含氮量為干重的12.5%，酵母為7.5%，霉菌為6.0%。根據(jù)含氮量×6.25，即可測定粗蛋白的含量。含氮量的測定方法有很多，等消化法和Dumas測N2氣法。Dumas測N2氣法是將樣品與CuO混合，在CO2氣流中加熱后產(chǎn)生氮?dú)猓占诤粑?jì)中，用KOH吸去CO2后即可測出N2的量。
　　3.2 測定含碳量
　　將少量（干重0.2~2.0 mg）生物材料混入1 mL水或無機(jī)緩沖液中，用2 mL 2%的K2Cr2O7溶液在100 ℃下加熱30分鐘后冷卻。加水稀釋至5 mL，在580 nm的波長下讀取吸光光度值，即可推算出生長量。需用試劑做空白對照，用標(biāo)準(zhǔn)樣品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
　　還原糖測定法
　　還原糖通常是指單糖或寡糖，可以被微生物直接利用，通過還原糖的測定可間接反映微生物的生長狀況，常用于大規(guī)模工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)上微生物生長的常規(guī)監(jiān)測。方法是，離心發(fā)酵液，取上清液，加入斐林試劑，沸水浴煮沸3分鐘，取出加少酸化，加入Na2S2O3臨近終點(diǎn)時(shí)加入淀粉溶液，繼續(xù)加Na2S2O3至終點(diǎn)，查表讀出還原糖的含量。
　　3.4 氨基氮的測定
　　離心發(fā)酵液，取上清液，加入甲基紅和作指示劑，加入0.02 mol/L的NaOH調(diào)色至顏色剛剛褪去，加入底物18%的中性甲醛，反應(yīng)數(shù)刻，加入0.02 mol/L的使之變色，根據(jù)NaOH的用量折算出氨基氮的含量。根據(jù)培養(yǎng)液中氨基氮的含量，可間接反映微生物的生長狀況。